Expressionskontrolle transferierter Toxingene in Tumorzellen

Der Transfer induzierbarer Toxingene ist ein neuer Ansatz zur Gentherapie von Gliomen. Voraussetzung dafür ist allerdings, daß die Expression des Toxingens gut von außen gesteuert werden kann, da während der Ausbreitung des Gens im Tumor (z.B. durch virale Vektoren) das Toxin ruhig gestellt sein muß, während es zum richtigen Zeitpunkt die Tumorzelle zerstören soll. Wir haben ein Transkriptionskontrollsystem (Tet-System), bei dem die Expression eines beliebigen Gens in Abhängigkeit von der Tetracyclinkonzentration gesteuert werden kann, in einen retroviralen Vektor integriert (wird als "Retro-Tet" von der Fa. Clontech vertrieben). Erste Ergebnisse mit dem Diphtherie-A-Toxin haben gezeigt, daß das Toxin zu stark ist, um es adäquat regulieren zu können. Ziel unserer Experimente ist es nun, ein Toxingen und einen genetischen Schalter zu finden, mit dem die Expression eines transferierten Toxingens in vitro und in vivo möglichst komplett supprimiert werden kann, auf der anderen Seite aber zum gewünschten Zeitpunkt soweit aktiviert wird, daß es zum Zelltod kommt. Außerdem charakterisiern wir das retrovirale System weiter und optimieren die Bedingungen für den Gentransfer in das Gehirn.

Drittmittelgeber:

Wilhelm-Sander-Stiftung

Beteiligte Wissenschaftler:

Dr. K. Keyvani, Prof. Dr. W. Paulus

Veröffentlichungen:

Keyvani, K., I. Baur, W. Paulus: Tetracycline-controlled expression but not toxicity of an attenuated diphtheria toxin mutant. Life Sci 64: 1719-1724 (1999)

Paulus, W., I. Baur, F.M. Boyce, X.O. Breakefield, S.A. Reeves: Self-contained, tetracycline-inducible retroviral vector system for gene delivery to mammalian cells. J Virol 70: 62-67 (1996)

Paulus, W., I. Baur, D.M. Oberer, X.O. Breakefield, S.A. Reeves: Regulated expression of the diphtheria toxin A gene in human glioma cells by prokaryotic transcriptional control elements. J Neurosurg 87: 89-95 (1997)

Yu, J.S., M. Sena-Esteves, W. Paulus, X.O. Breakefield, S.A. Reeves: Retroviral delivery and tetracycline-dependent expression of IL-1ß-converting enzyme (ICE) in a rat glioma model provides controlled induction of apoptotic death in tumor cells. Cancer Res 56: 5423-5427 (1996)