Westfälische Wilhelms-Universität Münster: Forschungsbericht 2003-2004 - Institut für Molekulare Mikrobiologie und Biotechnologie

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2003 - 2004

 

 
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Forschungsschwerpunkte 2003 - 2004  
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Arbeitskreis Prof. Dr. Susanne Fetzner
Cofaktorfreie bakterielle 2,4-Dioxygenasen: Aufklärung des Katalysemechanismus

 
2,4-Dioxygenasen, die im bakteriellen Abbau bestimmter Chinolinderivate von Bedeutung sind, katalysieren die Spaltung des N-heteroaromatischen Rings unter Freisetzung von Kohlenmonoxid. Diese 2,4-Dioxygenasen enthalten und benötigen weder Metallionen noch organische Cofaktoren und bilden eine eigene, bisher nicht untersuchte Enzymfamilie.

Da fast alle bekannten Oxygenasen Cofaktoren zur Aktivierung des molekularen Sauerstoffs nutzen, stellt sich die mechanistische Frage, wie cofaktorfreie Enzyme eine sauerstoffabhängige Reaktion katalysieren können. Untersuchungen zur Aufklärung des Katalysemechanismus der 2,4-Dioxygenasen umfassen die Analyse von Inhibitorwirkungen, die Identifizierung katalytisch relevanter Aminosäurereste durch Mutagenesestudien, sowie ESR- und UV/Vis-spektroskopische Untersuchungen. Durch Bi-Substrat-Steady-State-Kinetiken werden geschwindigkeitsbestimmende Schritte der enzymkatalysierten 2,4-Dioxygenolyse und der Aktivierung von O2 charakterisiert.

Projektdauer:

April 2000 bis April 2004

Drittmittelgeber:

Deutsche Forschungsgemeinschaft

Beteiligte Wissenschaftlerinnen:

Prof. Dr. Susanne Fetzner (Leiterin), Dipl.-Biol. Ursula Frerichs-Deeken (Universität Oldenburg)

Informelle Kooperation mit Prof. Dr. Jürgen Hüttermann und Dr. Reinhard Kappl, Universität des Saarlandes, Homburg, und mit Dr. Roberto Steiner, Structural Biology Laboratory, University of York, UK

Veröffentlichungen:

Fetzner S.: Oxygenases without requirement for cofactors or metal ions, Appl. Microbiol. Biotechnol. 60, 243-257, 2002

Frerichs-Deeken U., K. Ranguelova, R. Kappl, J. Hüttermann, S. Fetzner: Dioxygenases without requirement for cofactors, and their chemical model reaction: Compulsory order ternary complex mechanism of 1H-3-hydroxy-4-oxoquinaldine 2,4-dioxygenase involving general base catalysis by histidine 251 and single-electron oxidation of the substrate dianion, Biochemistry 43, 14485-14499, 2004

 

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