Ludwig-Boltzmann-Institut für Zellbiologie und Immunbiologie der Haut
Pathogenese der Autoimmunorchitis
In diesem Projekt soll der Pathomechanismus der experimentellen Autoimmun-Orchitis (EAO) unter
besonderer Berücksichtigung der Beteiligung immunologischer und nervaler Komponenten
aufgeklärt werden. Die Hypothese ist, dass bei der Entstehung der EAO das Immunprivileg des Hodens
durch eine Verschiebung des Gleichgewichts lokal produzierter immunregulatorischer Zytokine (TNF-a, IL-1,
IFN-c, MIF) aufgehoben wird. Bisherige gemeinsame Befunde belegen die Lokalisation von PAR-2
immunhistochemisch im Hoden auf dem Akrosom der Spermatozoen, den Peritubulär-Zellen und
residenten testikulären Makrophagen (Isub R et al. 2004, a,b,c, siehe
abstracts). Mit Hilfe von spezifischen PAR-2 Agonisten konnte die Funktionalität des Rezeptors auf
Peritubulär-Zellen und testikulären Makrophagen verifiziert werden. In Zusammenarbeit mit
Prof. Dr. A. Meinhardt (Giessen) soll daher die wahrscheinliche funktionelle Bedeutung
von PAR-2 bei der EAO analysiert werden. 1) Mit Western- und Northern-Blot Experimenten soll gezeigt
werden, ob die Synthese des PAR-2 Proteins und die Expression seiner mRNA in den verschiedenen Stadien der
EAO (25, 35, 50, 80 Tage) reguliert wird. 2) Mit immunhistochemischen und stereologischen Methoden
(Antikörper gegen Mast-Zell-Tryptase, Doppelmarkierungen) soll untersucht werden, ob die Mast-Zellen,
die beim unbehandelten Hoden der Ratte überwiegend subkapsulär liegen, bei der EAO dagegen
auch in den interstitiellen Entzündungszentren in räumlicher Nähe zu den Makrophagen zu
finden sind. 3) Testikuläre Makrophagen sollen in der AG Meinhardt kultiviert und mit PAR-2 Agonisten
bzw. mit Mast-Zell-Tryptase inkubiert werden. Anschließend soll eine mögliche Veränderung
der Sekretion und Expression pro- und anti-inflammatorischer Cytokine mittels ELISA in den
Kulturüberständen und durch RNase-Protection Assay erfasst werden. Diese Experimente sollen
klären, ob eine Aktivierung von PAR-2 durch Mast-Zell-Tryptase bei der Aufhebung des Immunprivilegs
des Hodens und der inflammatorischen Antwort des Hodens ursächlich beteiligt sein kann. 4) In vivo soll
die Funktion von PAR-2 Agonisten bei der EAO beobachtet werden.
