Struktur und Funktion der Metzinkine am Beispiel des prototypischen Astacins

Am Beispiel der prototypischen Zink-Peptidase Astacin erforschen wir die funktionellen Grundlagen der Astacine und Metzinkine durch zielgerichtete Mutagenese, Kristallstrukturanalyse von Mutanten und durch enzymkinetische Methoden. Astacine enthalten typischerweise ein katalytisches Modul von etwa 200 Aminosäureresten, dem eine Signalsequenz und eine Pro- Sequenz vorausgehen und dem oft regulatorische Domänen angehängt sind. Dies bedeutet, daß es sich hier um sezernierte Proteine handelt, die proteolytisch prozessiert werden müssen, um ihre aktive Konformation zu erhalten. Wir haben die inaktive Vorstufe des Astacins, das Proastacin, aus dem Flußkrebs isoliert und gleichzeitig als rekombinantes Protein in Bakterien exprimiert, um den Aktivierungsmechanismus aufzuklären.

Drittmittelgeber:

Deutsche Forschungsgemeinschaft

Beteiligter Wissenschaftler:

Prof. Dr. W. Stöcker

Veröffentlichungen:

Zwilling, R., W. Stöcker (eds.): The Astacins - Structure and function of a new protein family. Kovac Verlag, Hamburg (1997).

Geier, G., E. Jacob, W. Stöcker, R. Zwilling: Genomic organization of the zinc-endopeptidase astacin. Arch. Biochem. Biophys. 337, 300-307 (1997).

Yiallouros, I., A. Yiotakis, S. Vassiliou, R. Zwilling, W. Stöcker, V. Dive: Phosphinic peptides, the first potent inhibitors of astacin, behave as extremely slow binding inhibitors. Biochem. J. 331, 375-379 (1998).

Stöcker, W.: Astacin. In: Handbook of proteolytic enzymes, Barrett, A.J., Rawlings, N.D. & Woessner, F.jr. (eds.), Academic Press, New York,1219-1222 (1998).