Molekulare Neurobiologie

Obwohl bereits seit einiger Zeit intensiv untersucht, ist die physiologische Funktion von src-verwandten Protein-Tyrosinkinasen (PTK) noch immer unbekannt. In Forscherkreisen wird jedoch weithin akzeptiert, daß diese Moleküle, die präferenziell in Neuronen exprimiert werden, ihre biologische Funktion über die Tyrosinphosphorylierung spezifischer zellulärer Proteine ausüben. Diese Zielproteine müssen zunächst identifiziert werden, um die Rolle ihrer Phosphorylierung durch die PTK besser verstehen zu können. Durch in vivo bzw. in vitro Phosphorylierungsstudien ist es uns gelungen, Synaptophysin als Substrat eines Mitgliedes der PTK Familie, dem pp60^c-src zu identifizieren. Synaptophysin, ein Hauptmembranprotein kleiner synaptischer Vesikel, wird eine wesentliche Rolle bei der Exozytose in neuronalen und neuroendokrinen Zellen zugeschrieben.

In den letzten Jahren ist die Etablierung von permanenten Zellinien aus humanen Neuroblastomen ein hilfreiches Werkzeug für in vitro Studien über Phosphorylierungs- und Differenzierungsprozesse neuronaler Zellen geworden. Wir sind derzeit daran interessiert, die Expression sowie die Substratspezifität des pp60^c-src und seiner neuronalen Variante, der alternativ gespleißten Form, pp60^c-srcN, in verschiedenen Zellkultursystemen (z.B. Astrozytomen, Gliomen, Neuroblastomen, Teratokarzinomen) zu analysieren. In Interaktions- und in vitro Phosphorylierungstest werden dabei potentielle Zielproteine untersucht, die entweder für die normale Form und/oder die neuronale Form dieser Proteinkinase spezifisch sind.

Drittmittelgeber:

Deutsche Forschungsgemeinschaft, Sonderforschungsbereich 310 "Intra- und Interzelluläre Erkennungssysteme", Teilgebiet A 9, Fonds der Chemischen Industrie

Beteiligte Wissenschaftler:

Prof. Dr. A. Barnekow (Leiterin), Dipl.-Biol. Chr. Schöberl, Dr. J. Kremerskothen, PD Dr. K. Ballmer-Hofer (FMI Basel, Schweiz), Dr. S. Dilworth, Dr. Ch. Brewster (Med. School, London, U.K.), Prof. Dr. M. Sudol (Mount Sinai, Dept. Of Biochemistry, New York, USA), Prof. Dr. J.S. Brugge (Harvard Univ. Cambridge, USA), Dr. T. Hunter (Salk Inst., La Jolla, USA), Dr. G. Cesareni (IRBM, Pomezia, Rom, Italien)

Veröffentlichungen:

Schoeberl, C., E. Ossendorf, A. Barnekow: Charakterization of the neuronal isoform of the protein tyrosine kinase pp60^c-src. Europ. J. Cell Biol. 72, 75 (1997).

Schoeberl, C., E. Ossendorf, J. Kremerskothen, C. Brewster, S. Dilworth, A. Barnekow: Binding studies on the neuronal isoform of the non-receptor protein tyrosine pp60^c-src, pp60^c-srcN and potential target proteins. NATO ASI Series, Vol.H 102, 113-116 (1997).

Lappe, C., E. Ossendorf, J. Kremerskothen, A. Barnekow: Expression of glial and neuronal antigens in the cell line GOS1. Europ. J. Cell Biol. 75, 103 (1998).

Barnekow, A., C. Schoeberl, E. Ossendorf: Studies on pp60^c-src/pp60^c-srcN and synaptophysin. Europ. J. Neuroscience 10, 64 (1998).

Halfter, H., F. Stoegbauer, J. Kremerskothen, U. Hacker-Klom, A. Barnekow, E.B. Ringelstein: Growth inhibition of newly established humun glioma cell lines by leukemia inhibitory factor. J. Neuro-Oncol. 39, 1-18 (1998).