Isolierung eines regulatorischen Elements der rRNA-Synthese

Das Zellwachstum wird bei Bakterien über die Ribosomensyntheserate reguliert in Anpassung an die Verfügbarkeit von Substraten (insbesondere Aminosäuren). Im Mittelpunkt dieser Regulation stehen die Tandempromotoren (P₁, P₂) der rrn-Operons, welche die Rate der rRNA-Synthese kontrollieren und auf verschiedene pleiotrope Regulationselemente (wie z.B. ppGpp und FIS-Protein) reagieren. Versuche mit Zellextrakten von RNA-Synthesemutanten und E. coli-Kulturen mit unterschiedlichen Wachstumsraten haben gezeigt, daß regulatorische Veränderungen der rRNA-Synthese korreliert sind mit dem Auftreten eines bisher unbekannten Regulationsfaktors, der präferentiell die Funktion der P₁-Promotoren hemmt (IP₁). Wir haben die Bindung des Faktors an DNA und die Möglichkeit der chromatographischen Reinigung untersucht. Fraktionierung an DEAE-Sephacel, Phosphozellulose und "Dynabead"-gekoppelten PCR-Fragementen der P₁-Region erbrachte eine fast vollständige Reinigung des Faktors und Korrelation der Faktor-Aktivität mit drei Proteinen. Laufende Arbeiten beschäftigen sich mit der Identifizierung dieser Proteine und der Möglichkeit, daß sie einen regulatorischen Komplex am P₁-Promotor bilden.

Drittmittelgeber:

Deutsche Forschungsgemeinschaft

Beteiligte Wissenschaftler:

Prof. Dr. K. Müller (Leiter), Dr. W. Langert, Dipl.-Biol. V. Pavel