Gruppe Chronisch-entzündliche Darmerkrankungen
Verminderte Expression und Internalisierung der Tight-Junction-Proteine Occludin und ZO-1 bei Morbus Crohn
Einleitung:
Die Darmschleimhaut dient als dynamische Barriere und gewährleistet unter physiologischen Bedingungen eine regulierte Resorption von Nährstoffen und
Wasser. Im gesunden Darm versiegeln interzelluläre tight junctions (TJ) den Raum zwischen den intestinalen Epithelzellen und stellen einen wichtigen Bestandteil der
mukosalen Barriere dar. In vitro konnten wir zeigen, daß Interferon-gamma, welches vermehrt in der Mukosa von Patienten mit Morbus Crohn (MC) nachweisbar
ist, die epitheliale Durchlässigkeit durch Internalisierung und funktioneller Veränderungen mehrerer transmembranöser TJ-Proteine inclusive Occludin
erhöht. Dagegen war die Expression und Verteilung des zytoplasmatischen TJ-Proteins ZO-1 nicht verändert.
Zielsetzung:
Ziel dieser Studie ist es zu untersuchen, ob die Internalisierung der TJ-Proteine als pathophysiologischer Mechanismus für die erhöhte Permeabilität bei
MC in Frage kommt.
Material und Methoden:
Intraoperativ gewonnene Gewebeproben
aus dem terminalen Ileum von MC-Patienten (n=5) sowie von Kontrollen (n=5) wurden unmittelbar nach Resektion in flüssigem Stickstoff eingefroren. Die Expression
und Verteilung von Occludin und ZO-1 erfolgt mittels Immunelektronen- bzw. Immunfluoreszenz und konfokaler Mikroskopie. Western Blots für Occludin und ZO-1 im
Gesamtzelllysat erfolgen zum Nachweis/Ausschluss eines vermehrten Proteinabbaus.
Bisherige Ergebnisse:
In
Kontrollen und im unauffälligen CED-Gewebe war sowohl Occludin und ZO-1 in der Immunelektronen - als auch mikroskopie ausschliesslich an der apikalen Membran
zwischen Epithelzellen lokalisiert. Dagegen kam es in der aktiv entzündeten Ileumschleimhaut zur Internalisierung der TJ-Proteine Occludin und ZO-1 unter die apikale
Membran. Zudem war die Expression von Occludin und ZO-1 im Bereich der apikalen Zellmembran bei MC im Vergleich zu gesunden Kontrollen vermindert.
Beteiligte Wissenschaftler:
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