Forschungsbericht 1995-96
	Institut für Biochemie Wilhelm-Klemm-Straße 2 48149 Münster Tel. (0251) 83 - 3 32 00 Direktor: Prof. Dr. H.-J. Galla

Forschungsschwerpunkte 1995 - 1996 Fachbereich 17 - Chemie Institut für Biochemie Arbeitsbereich Prof. Dr. F. Spener

Stereoselektivität und Phospholipaseaktivität mikrobieller Lipasen

Durch protein und substrate engineering wurde die Stereoselektivität der Lipase aus Rhizopus orycae im Detail untersucht. Definitiv übt der sn-2 Substituent in natürlichen Glyceridsubstraten und Analoga einen Einfluß auf die Substratpositionierung und damit die Stereoselektivität aus. An der Bindung beteiligte Aminosäurereste wurden an Hand eines Strukturmodells identifiziert, mutagenisiert und die Stereoselektivität gezielt beeinflußt.

Im Gegensatz zur Proform zeigt die reife Lipase auch Phospholipaseaktivität. NMR- Untersuchungen zeigen, daß im Komplex aus klonierter reifer Lipase und kloniertem Propeptid letzteres entfaltet vorliegt und mit dem aktiven Zentrum wechselwirken kann.

Drittmittelgeber:

Deutsche Forschungsgemeinschaft, Europäische Union

Beteiligte Wissenschaftler:

Dr. L. Haalck (ICB), Dipl.-Chem. S. Irmer, Dipl.-Chem. A. Potthoff, Dipl.-Biol. E. Heibach, Prof. Dr. F. Paltauf (TU Graz), Prof. Dr. R.D. Schmid (Univ. Stuttgart), Prof. Dr. F. Spener (Leiter)

Veröffentlichungen:

Stadler, P., A. Kovac, L. Haalck, F. Spener, F. Paltauf: Stereoselectivity of microbial lipases. The substitution at position sn-2 of triacylglycerol analogs influences the stereoselectivity of different microbial lipases. Eur. J. Biochem. 277, 335-343, 1995

Zandonella, G., L. Haalck, F. Spener, K. Faber, F. Paltauf, A. Hermetter: Inversion of lipase stereospecificity for fluorogenic alkyldiacyl glycerols. Effect of substrate solubilization. Eur. J. Biochem. 231, 50-55, 1995

Hüwel, S., R. Behrens, F. Spener: Pankreasenzyme: Präparate im Vergleich, Pharm. Zeitung 37, 33-42, 1996

Kovac, A., P. Stadler, L. Haalck, F. Spener, F. Paltauf: Hydrolysis and esterification of acylglycerols and analogs in aqueous medium catalyzed by microbial lipases. Biochim. Biophys. Acta 1301, 57-66, 1996

Lang, D., B. Hofmann, L. Haalck, H.-J. Hecht, F. Spener, R.D. Schmid, D. Schomburg: Crystal structure of a bacterial lipase from Chromobacterium viscosum ATCC 6918 refined at 1.6 Å resolution. J. Mol. Biol. 259, 704-717, 1996

Stadler, P., G. Zandonella, L. Haalck, F. Spener, A. Hermetter, F. Paltauf: Inhibition of microbial lipases with stereoisomeric triradyglycerol analog phosphonates. Biochim. Biophys. Acta 1304, 229-244, 1996

Zandonella, G., L. Haalck, F. Spener, K. Faber, F. Paltauf, A. Hermetter: Enantiomeric perylene-glycerollipids as fluorgenic substrates for a dual-wavelength assay of lipase activity and stereoselectivity. Chirality 8, 481-489, 1996