Westfälische Wilhelms-Universität Münster
Forschungsbericht 2001-2002
 
Institut für Molekulare
Mikrobiologie und Biotechnologie

Corrensstraße 3
48149 Münster
Geschäftsführender Direktor: Prof. Dr. Alexander Steinbüchel
 
Tel. (0251) 83-39821
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Forschungsschwerpunkte 2001 - 2002

Fachbereich 13 - Biologie
Institut für Molekulare Mikrobiologie und Biotechnologie
Arbeitskreis PD Dr. Bernd H.A. Rehm


Molekulare und biochemische Charakterisierung der
Alginat-Polymerase in Pseudomonas aeruginosa

Im Rahmen des Vorhabens wird die Alginat-Polymerase, das Schlüsselenzym der Alginat-Biosynthese, aus Pseudomonas aeruginosa identifiziert, gereinigt und molekular charakterisiert werden. Ein empfindliches Enzymassay für die Alginat-Polymerase wurde entwickelt, welches die Reinigung des nativen Enzyms ermöglichen soll. Das gereinigte Enzym soll biochemisch und enzymologisch charakterisiert werden. Es wurden bereits Gene im Alginat-Biosynthese-Gen-Cluster identifiziert, deren Genprodukte vermutlich die Alginat-Polymerase in der Cytoplasmamembran rekonstituieren. Diese Gene sollen in Escherichia coli, Pseudomonaden und isogenen Alginat-negativen Mutanten von P. aeruginosa, die kein Alginat bilden, funktionell exprimiert werden. Dies soll sowohl Hinweise auf die Funktion der Genprodukte als essentielle Untereinheiten der Alginat-Polymerase liefern als auch die Reinigung dieses Enzyms erleichtern. Die Funktion der Alginat-Biosynthese bei der Überdauerung bereits differenzierter Biofilme soll evaluiert werden. Die Entstehung von P. aeruginosa-Biofilmen bei der Infektion der Lunge von Cystische Fibrose-Patienten geht einher mit einer chronischen Infektion, die durch Behandlung mit Antibiotika nicht beseitigt werden kann. Das Alginat stellt einen wesentlichen Bestandteil der Biofilm-Matrix dar, wobei die Bakterien in dieser Matrix geschützt vor Antibiotika und der Immunabwehr sind.

Drittmittelgeber:

Deutsche Forschungsgemeinschaft

Beteiligte Wissenschaftler:

PD Dr. Bernd H. A. Rehm (Leiter), Dipl.-Biol. Uwe Remminghorst, Jana Gutsche, Mark Salzig

Veröffentlichungen:

Rehm, B.H.A.: Alginates from bacteria. In: Steinbüchel, A. & Y. Doi (Eds.): Biopolymers, Vol. 5, 179-212, 2002
 
 

Hans-Joachim Peter
EMail: vdv12@uni-muenster.de
HTML-Einrichtung: Izabela Klak
Informationskennung: FO13DE02
Datum: 2003-07-08