Forschungsbericht 1997-98   
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Geschäftsführender Direktor: Prof. Dr. Alexander Steinbüchel

 
 
 
[Pfeile blau] Forschungsschwerpunkte 1997 - 1998
Fachbereich 18 - Biologie
Institut für Mikrobiologie
Arbeitskreis von Prof. Dr. A. Steinbüchel
 


Biosynthese von Polyestern

Im Arbeitskreis werden physiologische, biochemische und molekulare Grundlagen von Stoffwechselleistungen meist von Bakterien untersucht. Schwerpunkte bilden Untersuchungen zur mikrobiellen Synthese und zur biotechnologischen Produktion von technisch relevanten Biopolymeren. Hier kommt auch der Bereitstellung von ausreichenden Mengen neuer Biopolymere eine große Bedeutung zu, um die technischen Eigenschaften und Materialeigenschaften solcher Biopolymere in Zusammenarbeit mit anderen Instituten und Einrichtungen im Kooperation untersuchen zu können. Ein weiterer Schwerpunkt sind Untersuchungen zum biologischen Abbau von Biopolymeren und synthetischen Polymeren. Daneben werden in weiteren Schwerpunkten die Biosynthese und auch der Abbau niedermolekularer Verbindungen, wie z. B. Aromastoffe, Speicherlipide und Wachsester untersucht.

In beinahe allen Schwerpunkten wird angestrebt, die hierbei gewonnenen Erkenntnisse zur Etablierung neuer oder verbesserter biotechnologischer Verfahren zu nutzen. Die Untersuchungen sollen dazu beitragen, nachwachsende Rohstoffe, Abfall- und Reststoffe der chemischen Industrie oder der Landwirtschaft, interessante Inhaltsstoffe von Pflanzen sowie auch fossile Rohstoffe mit Hilfe biotechnologischer Verfahren in für die Industrie interessante Produkte zu überführen oder zu einer sinnvollen Entsorgung von Industrieprodukten und Produkten des täglichen Lebens beizutragen.

Seit ca. 12 Jahren wird in der Arbeitsgruppe die Biosynthese wasserunlöslicher, aus Hydrofettsäuren aufgebauten Polyester (PHF) untersucht. Als Modellorganismen dienen Ralstonia eutropha,Rhodococcus ruber, anoxygene phototrophe Bakterien (z. B. Chromatium vinosum) und oxygene phototrophe Bakterien (z.B. Synechocystis sp.). Diese Untersuchungen haben wesentlich zur Aufklärung von Biosynthesewegen der PHF und zur Entdeckung neuer Bausteine von PHF sowie zur Klonierung und Ermittlung der Primärstrukturen des Schlüsselenzyms PHF-Synthase aus mittlerweile ca. 35 Bakterien beigetragen. Mittlerweile werden auch detaillierte Untersuchungen zur Aufklärung von Struktur-Funktionsbeziehungen von PHF-Synthasen und anderer, an Synthese und Akkumulation von PHF beteiligten Proteine durchgeführt. Neuerdings wird auch die Biosynthese des wasserlöslichen Polyesters Polyäpfelsäure durch Aureobasidium pullulans untersucht.

In der Arbeitsgruppe wurden auch Verfahren zur in vitro Synthese von PHF mit Hilfe isolierter Enzyme durchgeführt.

Die Untersuchungen zielen auch darauf ab, nachwachsende Rohstoffe oder davon abgeleitete Verbindungen wie Lävulinsäure und Biodiesel, Rest- und Abfallstoffe wie z. B. Melasse sowie Braunkohlen in PHF zu überführen, die als neue, biologisch abbaubare Werkstoffe eingesetzt werden können. In Bioreaktoren bis zu 500 L Nutzvolumen werden Polymermuster zur Ermittlung der Materialeigenschaften durch hieran interessierte Kooperationspartner produziert.

Im Rahmen eines durch das BML unterstützten Projektes werden Pflanzengenetikern die Gene für PHF-Biosynthese aus Bakterien zur Verfügung gestellt. Ziel ist es, diese Gene in Pflanzen zu übertragen und zu exprimieren, um zukünftig transgene Pflanzen für die Produktion von PHF aus CO2 und durch Sonnenenergie zu erhalten.

Drittmittelgeber:

DFG, BMBF, BML, Deutsche Forschungsanstalt für Luft- und Raumfahrt, Max-Buchner Forschungsstiftung, Fonds der chemischen Industrie, Europäische Union, Monsanto (St. Louis, USA)

Beteiligte Wissenschaftler:

Dr. Silke Hein, Dr. Bernd Füchtenbusch, Dr. Dirk Fabritius, Dr. Bernd H. A. Rehm, Dr. Shuangjiang Liu, Dr. Matthias Liebergesell, Dr. Roman Wieczorek, Dipl.-Ing. Herbert Ahlers, Dipl.-Ing. Volker Gorenflo, Dipl.-Chem. Silke Fiedler, Dipl.-Biol. Astrid Hoppensack, Dipl.-Biol. Stephan Langenbach, Karsten Rose, Dipl.-Biol. Rainer Kalscheuer, Tina Lütke-Eversloh, Patricia Spiekermann, Christian Brämer, Dipl.-Biol. Stephanie Grote, Qingsheng Qi, Filomena de Andrade Rodrigues, Prof. Shuishan Song, Francis Hezayen, Dipl.-Biol. A. Renkert, Prof. Dr. R. Antonio, Prof. Dr. Alexander Steinbüchel

Veröffentlichungen:

Mayer, F., M. H. Madkour, U. Pieper-Fürst, R. Wieczorek, M. Liebergesell, A. Steinbüchel: Electron microscopic observations on the macromolecular organization of the boundary layer of bacterial PHA inclusion bodies., J. Gen., Appl., Microbiol. 42:445-455, 1997

Föllner, C.G., M. Madkour, F. Mayer, W. Babel, A. Steinbüchel: analysis of the PHA granule-associeated proteins GA20 and Ga11 in Methylobacterium extorquens and Methylobacterium rhodesianum. J. Basic Microbiol. 37:11-21, 1997

Liu, S.-J., A. Steinbüchel: Production of poly(malic acid) from different carbon cources and its regulation in Aureobasidium pullulans. Biotechnol. Lett. 19:14-14, 1997

Langenbach, S., B.H.A. Rehm, A. Steinbüchel: Functional expression of the PHA synthase gene phaC1 from Pseudomonas aeruginosa in Escherichia coli results in poly(-hydroxyalkanoate) synthesis. FEMS Microbial. Lett. 150:303-309, 1997

Fabritius, D., H.J. Schäfer, A. Steinbüchel: Biotransformation of linoleic acid with the Candida tropicalis M25 mutant. Appl. Microbiol. Biotechnol. 48:83-87, 1997

Steinbüchel, A., V. Gorenflo: Biosynthetic and biodegradable polyesters from renewable resources: current state and prospects. Macromolecular Symposia 123:61-66, 1997

Hein, S., B. Söhling, G. Gottschalk, A. Steinbüchel: Biosynthesis of poly(4-hydroxybutyric acid) by recombinant strain of Escherichia coli. FEMS Microbiol. Lett. 153:411-418, 1997

Eggink, G., A. Steinbüchel, Y. Poirier, B. Witholt (eds.): Proceedings of the "1996 International Symposium on Bacterial Polyhydroxyalkanoates". Research Press, Ottawa, Canada, 179 pages, 1997

Steinbüchel, A., R. Wieczorek, H.M. Alvarez, R. Jossek: Assembly of bacterial PHA granules and other aspects of PHA biosynthesis. Proceedings of the 1996 International Symposium on bacterial polyhydroxyalkanoates. G. Eggink, A. Steinbüchel, Y. Poirier, B. Witholt (Eds.). NRC Research Press, Ottawa, pp. 36-47

Qi, Q., B.H.A. Rehm, A. Steinbüchel: Synthesis of poly(3-hydroxyalkanoates in Escherichia coli expressing the PHA synthase gene phaC2 from Pseudomonas aeruginosa: comparision of PhaC1 and PhaC2. FEMS Microbiol. Lett. 157:155-162, 1997

Liu., S., A. Steinbüchel: Production of polymalic acid by Aureobasidium pullulans CBS 591.75 and DSM 2404 in 2L and 20L fermentors. Chin. J. Biotechnol. 13:279-283, 1997

Jossek, R., R. Reichelt, A. Steinbüchel:In vitro biosynthesis of poly(3hydroxybutyric acid) by using purified poly(hydroxyalkanoic acid) synthase of Chromatium vinosum. Appl. Microbiol. Biotechnol. 49:258-266

Steinbüchel, A., B. Füchtenbusch, V. Gorenflo, S. Hein, R. Jossek, S. Langenbach, B.H.A. Rehm: Biosynthesis of polyesters in bacteria and recombinant organisms. Polym. Degrad. Stabil. 59:177-182, 1998

Steinbüchel, A.: Biokonversion pflanzlicher Photosyntheseprodukte, von CO2 und technischen Rohstoffen in Polyhydroxyfettsäuren. Proceedings of the 1st Workshop "Biokonversion nachwachsender Rohstoffe" in Detmold, Fachargentur Nachwachsende Rohstoffe (Ed.), Landwirtschaftsverlag, Münster, pp. 231-237, 1998

Fabritius, D., H.J. Schäfer, A. Steinbüchel: Mikrobielle Gewinnung von 3-Hydroxydicarbonsäuren durch Candida tropicalis M25. Proceedings of the 1st Workshop "Biokonversion nachwachsender Rohstoffe" in Detmold, Fachagentur Nachwachsende Rohstoffe (Ed.), Landwirtschaftsverlag, Münster. pp. 231-237, 1998

Steinbüchel, A. (Ed.): Proceedings of the Symposium H "Biodegradable Polymers and Macromolecules" at the International Conference on Advanced Materials ICAM'97/European Materials Research Society Spring Meetin E-MRS'97 in Strasbourg, June 16-20, Polym. Degrad. Stabil. 59:1-393, 1998

Füchtenbusch, B., D. Fabritius, M. Wältermann, A. Steinbüchel: Biosynthesis of novel copolyesters containing 3-hydroxypivalic acid by Rhodococcus ruber NCIMB40126 and related bacteria. FEMS Microbiol. Lett. 159:85-92, 1998

Schmack, G., V. Gorenflo, A. Steinbüchel: Bioproduction and characterization of 4HV-containing polyesters. Macromolecules 31:644-649, 1998

Pettinari, M.J., G.J. Vazquez, N. Krüger, P.-S. Vary, A. Steinbüchel, B.S. Mendez: Trans activation of the Escherichia coli genes for short-chain fatty acid degradation by a regulatory protein from Bacillus megaterium. Appl. Microbiol. Biotechnol. 49:737-742, 1998

Hein, S., T. Hai, A. Steinbüchel:Synchocystis sp. PCC6803 posseses a two-component polyhydroxyalkanoic acid synthase like anoxygenic purple sulfur bacteria. Arch. Microbiol. 170:162-170, 1998

Steinbüchel, A.: Proceedings of the Symposium H "Biodegradable Polymers & Macromolecules" at the EMRS Spring meeting. Strasbourg (France), June 16-20, 1997. Guest editorial. Polym. Degrad. Stabil. 59:1, 1998

Füchtenbusch, B., M. Wältermann, A. Steinbüchel: Biotransformation of 2,2-dimethyl-1,3-propanediol to 3-hydroxypivlic acid by Acetobacter acetii DSMZ3508 and related bacteria. Biotechnol. Lett. 20:507-510

Steinbüchel, A.: Biotechnische Produktionsverfahren für "Kunststoffe" und andere relevante Polymere. In: Chancen und Risiken der Gentechnik im Umweltschutz. Thüringer Ministerium für Landwirtschaft, Naturschutz und Umwelt (Ed.), Gotha, Druck und Verpackung, Wechmar, pp. 150-162, 1998

Steinbüchel, A., C. Brämer, B. Füchtenbusch, V. Gorenflo, T. Hai, S. Hein, R. Jossek, S. Langenbach, Q. Qi, B.H.A. Rehm, S. Song: Poly(hydroxyalkanoic acid) biosynthesis pathways. In: A. Steinbüchel (Ed.) Proceedings of the international symposium on "Biochemical Principles and Mechanisms of Biosynthesis and Biodegradation of Polymers" in Münster (Germany), June 3-6, 1998, Wiley-VCH publisher, pp. 35-47, 1998

Mittendorf, V., N. Krüger, A. Steinbüchel, Y. Poirier: Biosynthesis of medium-chain-length polyhydroxyalkanoates in transgenic Arabidopsis plants expressing the PHAC1 and PHAC2 synthases from Pseudomonas aeruginosa. In: A. Steinbüchel (Ed.) Proceedings of the internationals symposium on "Biochemical Principles and Mechanisms of Biosynthesis and Biodegradation of Polymers" in Münster (Germany), June 3-6, 1998, Wiley-VCH publisher, pp. 368-375, 1998

Fabritius, D., H.-J.Schäfer, A. Steinbüchel: Bioconversion of sunflower oi, rapeseed oil and ricinoleic acid by Candida tropicalis M25. Appl. Microbiol. Biotechnol. 50: 573-578, 1998

Jossek, R., A. Steinbüchel:In vitro synthesis of poly(3-hydroxybutyric acid) by using an enzymatic coenzyme A recycling system. FEMS Microbiol. Lett. 168:319-324, 1998

Steinbüchel, A., B. Füchtenbusch: Bacterial and other biological systems for polyester production. Trends in Biotechnology 16:419-427, 1998

Rehm, B.H.A., N. Krüger, A. Steinbüchel: A new metabolic link between fatty acid de novo synthesis and polyhydroxyalkanoic acid synthesis. The phaG gene from Pseudomonas putida KT2440 encodes a 3-hydroxyacyl-acyl carrier protein-coenzyme A transferase. J. Biol. Chem. 273:24044-24051

Qi, Q., A. Steinbüchel, B.H.A. Rehm: Metabiolic routing towards polyhydroxyalkanoic acid synthesis in recombinant Escherichia coli (fadR): inhibition of fatty acid b-oxidation by acrylic acid. FEMS Microbiol. Lett. 167:89-94

Langenbach, S.: Synthese von Polyestern aus 3-Hydroxyoctansäure und/oder 3-Hydroxydecansäure in rekombinanten Stämmen von Escherichia coli. Diplomarbeit Universität Münster, 1997

Grote, S.: Untersuchungen zur Polyesterbiosynthese in PHF-leaky Mutanten von Alcaligenes eutrophus und Analysen des Molekulargewichtes der Polyester. Diplomarbeit Universität Münster, 1998

Fabritius, D.: Funktionalisierung nicht-aktivierter CH-Bindungen durch Mikroorganismen. Dissertation Universität Münster, 1997

Wieczorek, R.: Regulation der Expression von phaP in Alcaligenes eutrophus. Dissertation Universität Münster, 1997

 
 
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Hans-Joachim Peter
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Datum: 1999-06-16